Desenvolvimento de um ensaio imunofluorométrico para a medida da molécula inteira da gonaatrofina coriônica (hCG) no soro / Development of an immunofluorometric assay for serum measurement of the whole molecule of human chorionic gonatropin (hCG)

Tendo como base dois anticorpos monoclonais produzidos em nosso laboratório, um específico contra a subunidade beta de hCG/LH (E2P1) e outro específico contra um epítopo descontínuo presente na molécula inteira da hCG (F1P16), desenvolvemos um ensaio imunométrico específico para a molécula inteira de hCG. O monoclonal E2P1 foi adsorvido a placas de microtitulaçåo e o monoclonal F1P16 foi marcado com Európio; o ensaio consta de duas incubaçöes sequenciais de 1h cada e leitura final de fluorescência em fluorômetro tempo-sincronizado. A sensibilidade calculada foi de 1,8 UI/L; o perfil de imprecisåo mostrou erro inferior a 19 por cento entre os valores de 5 a 3000 UI/L; o coeficiente de variaçåo interensaio mostrou-se de 8 por cento para uma amostra de valor médio de 1065 UI/L (n=15) e de 13,9 por cento para outra de valor médio de 28 UI/L (n=15). A comparaçåo com método equivalente (Delphia hCG) nåo mostrou nenhuma discordância em 300 amostras dosadas sequencialmente, sendo que em 1388 amostras onde os valores eram iguais ou superiores a 20 UI/L pelo Delfia, obtivemos alto índice de correlaçåo (r=0,988). Os valores obtidos pelo nosso método mostraram-se discreta, porém, significativamente mais elevados, com medianas de 4610 e 4370 UI/L, respectivamente

Desenvolvimento de um método radioimunológico para a dosagem de tiroglobulina sérica / Development of a radioimmunologic methods for a thyroglobulin serum dosage

Desenvolvemos um radioimunoensaio para a dosagem de tiroglobulina sérica (Tg), que apresenta as seguintes características: o preparado de Tg produzido a partir de tiróide humana através da extraçäo, precipitaçäo com sulfato de amônio e ultracentrifugaçäo demonstrou pureza e homogeneidade adequadas, verificadas pela eletroforese e imunoeletroforese; a Tg inoculada em coelhos produziu anticorpos anti-Tg com título 1:800.000, afinidade de 0,8 x 10(10)l/mol e ausência de atividade cruzada com outras substâncias; a Tg radioativa empregada no ensaio demonstra identidade com a Tg da curva padräo, porém perde rapidamente as condiçöes ideais de utilizaçäo, devendo, em conseqüência, ser sempre repurificada imediatamente antes do uso; o ensaio de Tg apresenta sensibilidade de 0,8 a 1,5ng/ml, coeficiente de variaçäo intra-ensaio de 12 por cento, coeficiente de variaçäo interensaio de 19 por cento, 13 por cento e 18 por cento, respectivamente, para valores elevados, normais e baixos de Tg e valores normais que variam desde o limite de detectabilidade do método até 31ng/ml.